核酸检测一次的有效期是7天。新型冠状病毒核酸检测的有效期主要取决于新型冠状病毒肺炎患者的潜伏期，一般潜伏期是14天，绝大多数潜伏期为3-7天，在潜伏期内都有传染性，所以新型冠状病毒核酸检测的有效期一般为七天。
建议如果是高风险地区，有发热、乏力、干咳等症状的患者，即使新冠病毒核酸检测为阴性，也建议24小时后再次复查核酸检测。